用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA)抑制自噬，观察其对顺铂诱导的U251细胞凋亡的影响及其作用机制。
方法MTT法检测3-MA对顺铂诱导的U251细胞生长抑制的影响；Hoechst33342染色，观察3-MA对顺铂诱导细胞凋亡的影响；蛋白免疫印迹法检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)相关蛋白，泛素化蛋白(ubquitinated proteins Ub1)，蛋白二硫键异构酶(protein disulfide isomerase，PDI)，葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78，Grp78)的表达，并检测了C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(C/EBP homologous protein，CHOP)，活化的Caspase-4和活化的Caspase-3的表达水平；免疫荧光染色后共聚焦显微镜观察3-MA与顺铂联合作用于U251细胞，微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3)、PDI的表达。
结果MTT结果显示，3-MA可以促进顺铂对U251生长抑制(顺铂组与对照组相比，P＝0.00324；联合组与顺铂组相比P＝0.02249)，Hoechst33342染色结果显示3-MA可以促进顺铂对U251凋亡诱导作用；免疫印迹法结果显示，3-MA增加了顺铂诱导的细胞内泛素化蛋白、ERS标志蛋白PDI、Grp78的表达(顺铂组与对照组相比，P值分别为0.00294, 0.0012，0.00179；联合组与顺铂组相比，P值分别为0.01896, 0.01515，0.00734)；促进顺铂诱导的CHOP表达，增强了Caspase-4和Caspase-3的活化(顺铂组与对照组相比，P值分别为0.00081, 0.00017，0.00018；联合组与顺铂组相比，P值分别为0.00671, 0.00934，0.01124)，3-MA可以有效抑制顺铂诱导的U251细胞LC3II的表达(顺铂组与对照组相比，P＝0.00447；联合组与顺铂组相比，P＝0.01588)；免疫荧光染色结果显示，3-MA与顺铂联合作用于U251细胞，抑制了LC3的聚集、促进了PDI的表达。
结论3-MA通过抑制自噬，增强了顺铂诱导的ERS，从而促进顺铂诱导的U251细胞凋亡。