牙齿发育相关基因adam28多克隆抗体的制备及鉴定

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目的:制备及鉴定抗ADAM28的多克隆抗体。方法:采用反转录一多聚酶链式反应(RT—PCR)扩增出adam28基因的蛋白编码区序列,克隆到中间载体pMDl8一TVector中,再经双酶切得到adam28片段定向克隆到pGEX-4T-1载体中,构建融合表达载体pGEX-4T—adam28,在大肠杆菌中用IPTG进行诱导表达,得到GST—ADAM28融合蛋白,经过初步纯化及SDS—PAGE电泳,在35300的新蛋白带处直接割胶,作为抗原免疫新西兰大白兔后获取抗体。结果:成功构建融合表达载体pGEX-4T—ad
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