【摘 要】
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目的:观察脓毒症对小鼠内侧隔区-内侧前额叶皮质(MS-mPFC)胆碱能投射的影响.方法:选取6周龄雄性C57BL/6小鼠,于mPFC区注射逆向跨单突触狂犬病毒,通过神经元示踪,观察MS区病毒表达情况,明确mPFC的投射来源.于8周龄雄性C57BL/6小鼠侧脑室注射脂多糖(LPS)诱导急性脓毒症相关性脑病模型,使用递质探针技术,观察mPFC区乙酰胆碱(ACh)递质水平改变.进一步采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠脓毒症模型,利用胆碱乙酰基转移酶(ChAT)试剂盒检测Sham与CLP两组小鼠MS区ChAT活
【机 构】
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空军军医大学西京医院重症医学科,西安710032;空军军医大学西京医院麻醉与围手术期医学科,西安710032
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目的:观察脓毒症对小鼠内侧隔区-内侧前额叶皮质(MS-mPFC)胆碱能投射的影响.方法:选取6周龄雄性C57BL/6小鼠,于mPFC区注射逆向跨单突触狂犬病毒,通过神经元示踪,观察MS区病毒表达情况,明确mPFC的投射来源.于8周龄雄性C57BL/6小鼠侧脑室注射脂多糖(LPS)诱导急性脓毒症相关性脑病模型,使用递质探针技术,观察mPFC区乙酰胆碱(ACh)递质水平改变.进一步采用盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠脓毒症模型,利用胆碱乙酰基转移酶(ChAT)试剂盒检测Sham与CLP两组小鼠MS区ChAT活力,Western Blot方法检测两组小鼠mPFC区整体α7nAChR的表达,免疫荧光染色检测MS区胆碱能神经元坏死性凋亡.结果:侧脑室注射LPS后,小鼠mPFC区ACh递质水平明显下降.同时CLP诱导的小鼠SAE模型中,MS区ChAT活力下降,mPFC区α7nAChR表达减少.进一步免疫荧光染色结果显示,CLP小鼠MS区胆碱能神经元坏死性凋亡增加.结论:脓毒症导致MS区胆碱能神经元坏死性凋亡增加、ACh合成酶活性下降、突触末端ACh释放减少、mPFC区ACh关键受体α7nAChR表达下降等MS-mPFC胆碱能投射障碍,是导致SAE的重要机制.
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