检测伪狂犬病毒gB基因荧光定量PCR方法的建立

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wysaccp

【摘要】

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利用DNAMAN软件对GenBank登录的伪狂犬病病毒（PRV）各毒株gB基因序列进行比对分析,选择其保守区域设计合成特异性的引物和TaqMan探针,同时利用普通PCR技术扩增获得全长的伪狂犬

【作者】

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朱淑芬朱瑞良乔彩霞高志强张利峰张鹤晓吴亚琼王慧

【机构】

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山东农业大学动物科技学院,北京出入境检验检疫局,青岛农业大学

【出处】

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中国兽医学报

【发表日期】

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2012年10期

【关键词】

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伪狂犬病毒 GB基因荧光定量PCR 检测 pseudorabies virus gB gene fluorescence quantitative PCR

【基金项目】

：

国家科技基础性工作专项“重大动物疫病病原及相关制品标准物质研究”资助项目（2008FY130100）

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利用DNAMAN软件对GenBank登录的伪狂犬病病毒（PRV）各毒株gB基因序列进行比对分析,选择其保守区域设计合成特异性的引物和TaqMan探针,同时利用普通PCR技术扩增获得全长的伪狂犬病毒gB基因,并克隆到pMD20-T载体上作为阳性标准品。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了一种快速检测伪狂犬病病毒的荧光定量PCR技术。该检测技术具有较高的灵敏性、特异性和可靠性。对制备的pMD-gB阳性标准品的检测结果表明,所建立的伪狂犬病毒TaqMan荧光定量PCR最低检测极限可达1.50×1

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