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目的
探讨药理剂量维生素C体外杀灭流感病毒A/CA/7/09 (H1N12009)的作用及其机制。
方法将流感病毒A/CA/7/09感染人类正常呼吸道上皮细胞(NHBE)后，立即或8 h后分别加入2.5～20 mmol/L维生素C、维生素C＋过氧化氢酶和不含维生素C的NHBE培养基，或直接在流感病毒A/CA/7/09中分别加入上述培养基。培养4～12 h后，分别收集培养基上清液，通过半数组织培养感染剂量(TCID50)法对病毒进行定量检测。利用高压液相层析法(HPLC)测量样品中维生素C含量和Clark型氧电极法测量样品中过氧化氢浓度。
结果药理剂量的维生素C可杀灭体外游离的流感病毒，也能杀灭体外培养细胞内的流感病毒；维生素C杀灭病毒的效应与剂量相关：2.5 mmol/L的维生素C可杀灭约90%的流感病毒，20 mmol/L的维生素C可杀灭所有病毒；维生素C在病毒感染不同时间窗的杀灭病毒效应不同，在病毒感染8～12 h内，维生素C杀灭病毒的效果最好；4 h内可清除感染NHBE细胞的所有流感病毒；感染后期维生素C杀灭病毒的效果最差。维生素C杀灭病毒的效应可被过氧化氢酶完全抑制。
结论药理剂量的维生素C作为一种强氧化剂，可能通过生成过氧化氢发挥杀灭细胞内外流感病毒的作用。