【摘 要】
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[目的]检测Cathepsin基因家族在脊髓损伤早期的表达和大剂量甲强龙干预后的变化,明确大剂量甲强龙是否通过溶酶体凋亡途径发挥神经保护作用.[方法]9只日本大耳兔随机分为3组:
【机 构】
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云南昆明医学院第一附属医院,骨科,650032;云南昆明医学院第一附属医院,血液科,650032
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[目的]检测Cathepsin基因家族在脊髓损伤早期的表达和大剂量甲强龙干预后的变化,明确大剂量甲强龙是否通过溶酶体凋亡途径发挥神经保护作用.[方法]9只日本大耳兔随机分为3组:对照组(C组,n=3),模型组(M组,n=3)和药物组(D组,n=3).C组仅进行椎板切除术,M组和D组进行椎板切除后采用Allen法建立急性脊髓损伤模型.D组在造模后2 h按人-兔等效剂量给予大剂量甲强龙冲击治疗.造模后8 h处死实验动物,分别获取损伤区为中心的长约8 mm的脊髓组织液氮保存,采用Trizol法提取总RNA,用9张Agilent兔子全基因4 ×44K芯片进行检测.采用GeneSpring 11.0软件,以P<0.05且倍数变化(FC)≥2筛选出差异表达基因,本文针对Cathepsin基因家族进行分析.[结果]成功建立脊髓损伤的动物模型并获得相应的组织标本.9组标本总RNA的质量均能满足基因芯片检测要求.基因芯片结果显示:在10个Cathepsin基因家族成员中,仅Cathepsin Z和proathepsin E在创伤后呈现差异性表达.Cathepsin C、D、F、K、L、S和W表达均无差异(M-C).甲强龙冲击治疗后Cathepsin家族基因表达均无差异(D-M).[结论]Cathepsin Z和E参与了脊髓损伤早期病理过程,但大剂量甲强龙抑制神经凋亡可能不通过溶酶体途径.
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