【摘 要】
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新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染导致急性或致命性肺炎,该病毒是继严重急性呼吸系统综合征病毒(SARS-CoV)和中东呼吸系统综合征病毒(MERS-CoV)之后发现的又一由动物传染给人且
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京100193;农业部兽用药物和兽医生物技术北京科学观测实验站,北京100193
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新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染导致急性或致命性肺炎,该病毒是继严重急性呼吸系统综合征病毒(SARS-CoV)和中东呼吸系统综合征病毒(MERS-CoV)之后发现的又一由动物传染给人且能够人传人的冠状病毒.为快速确诊感染SARS-CoV-2的人和动物,急需建立一种快速高效的检测方法.本研究根据GenBank公布的SARS-CoV-2全基因组序列,利用LAMP Desiner2.0软件筛选高效且特异性强的组合环引物和Bst4.0DNA聚合酶的扩增特性,即依赖RNA为模板进行DNA合成,建立一种高效、快速、灵敏检测SARS-CoV-2的方法.结果表明,该方法实现了5～ 20拷贝的病毒RNA检测目标,并可直接检测灭活病毒.因此,临床样本无需RNA提取,经灭活处理后即可进行样品检测.扩增后的核酸分子与OG(Orange-Green)染料结合,阳性样品为绿色,阴性样品为橙黄色.本研究建立的SARS-CoV-2一步法可视化恒温快速检测方法,实现了核酸快速检测,且具有高灵敏度,为SARS-CoV-2检测提供了新的方法选择.
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