基于UP LC-LTQ-Orbitrap-MS和网络药理学探索黄芪桂枝五物汤治疗类风湿关节炎的作用机制及实验验证

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该研究采用超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)对黄芪桂枝五物汤(HQGZ)的主要活性成分进行分析,从黄芪桂枝五物汤中共鉴定出活性成分50种,基于鉴定的化学成分通过网络药理学分析共得到潜在作用靶点108个,其中关键靶点87个;在此基础上,对活性成分进行靶标预测、功能研究及疾病富集.关键靶点的功能富集分析结果表明,黄芪桂枝五物汤可能主要通过鞘脂信号传导途径、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等途径,以及核糖核酸(RNA)聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、炎症反应等生物过程发挥治疗作用.在HQGZ的活性成分进行网络药理学分析及预测的基础上,结合类风湿关节炎的疾病特点,该研究对TNF信号通路中的关键蛋白进行细胞学实验进行验证,实验结果表明,HQGZ可以显著降低TNF-α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的CASP3、TNF、RELA和IKBKB蛋白表达.UPLC-LTQ-Orbitrap-MS、网络药理学和实验验证结果表明,HQGZ中活性成分可能通过调控TNF信号通路中的关键蛋白,从而发挥抑制炎症反应、调节免疫功能及调控细胞凋亡的作用来治疗类风湿关节炎.
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