基于GroEL基因的实时荧光定量PCR检测恙虫病东方体方法的建立及评价

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kui5387
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目的 建立一种敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于检测临床标本中的恙虫病东方体.方法 根据恙虫病东方体GroEL蛋白基因序列设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测方法.并从灵敏度、特异度、重复性及临床标本的检测能力等方面对本方法进行综合评价.结果 建立的实时荧光定量PCR方法具有良好的特异性,可检测出恙虫病东方体Gilliam、Karp、Kato和Kawasaki株.建立的标准曲线循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈现良好的线性关系(r=0.99),灵敏度分析显示样品最低检出浓度为21.8拷贝/μL.批
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