【摘 要】
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目的:观察α-突触核蛋白基因在SH-SY5Y细胞内过表达对细胞的影响。方法:LipofectAMINE法转染SH-SY5Y细胞,用G418对转基因细胞进行筛选,免疫荧光细胞化学检测α-突触核蛋白表
【机 构】
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华北煤炭医学院基础医学部,首都医科大学北京神经科学研究所
【基金项目】
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国家重点基础研究规划项目(No.G1999054008),(G2000057005);国家自然科学基金资助项目(No.30240055);北京市自然科学基金资助项目(No.70022005);河北省自然科学基金资助项目(No.C2004000689);河北省科学技术与社会发展计划项目(05547008D-4)
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目的:观察α-突触核蛋白基因在SH-SY5Y细胞内过表达对细胞的影响。方法:LipofectAMINE法转染SH-SY5Y细胞,用G418对转基因细胞进行筛选,免疫荧光细胞化学检测α-突触核蛋白表达,氧化应激敏感的荧光素探针DCF-DA对活细胞进行染色后用荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞内氧应激状况,还原型谷胱甘肽测定试剂盒通过分光光度计检测细胞内还原型谷胱甘肽水平。结果:转染细胞筛选后,细胞呈α-突触核蛋白免疫反应阳性;转α-突触核蛋白基因细胞内存在DCF信号增强和还原型谷胱甘肽水平下降。结论:α-突触核蛋白过表达可引起细胞内氧应激,表明α-突触核蛋白在帕金森病发病机制中可能起重要作用。
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