原位PCR检测雏鹅体内鹅细小病毒方法的建立及其应用

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通过建立能对石蜡切片中鹅细小病毒(GPV)核酸进行定位韵原位PCR方法,为GPV在鹅体内的定位、致病机理研究等提供有效的试验手段。根据GPV的VP3基因序列设计PCR引物和寡核苷酸探针,以GPV感染鹅肝脏和空肠组织石蜡标本制作切片,经蛋白酶K消化、原位PCR扩增和碱性磷酸酶标记的寡核苷酸探针原位杂交,建立了检测石蜡标本中GPV的间接原位PCR方法并应用于自然感染GPV高免血清紧急免疫后鹅肝脏和空肠组织临床病料检测。结果显示间接原位PCR对人工感染GPV死亡鹅肝脏和空肠的石蜡标本检测结果为阳性,而鹅病毒性肝
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