【摘 要】
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目的 探讨白色念珠菌胞外磷脂酶B(PLB)在兔真菌性角膜炎中的毒力作用.方法 为实验研究.选用白色念珠菌PLB基因缺失株及其相应母体株,角膜接触镜法建立两种菌株兔角膜感染动物
【机 构】
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天津市眼科医院,山东省眼科研究所山东省眼科学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地
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目的 探讨白色念珠菌胞外磷脂酶B(PLB)在兔真菌性角膜炎中的毒力作用.方法 为实验研究.选用白色念珠菌PLB基因缺失株及其相应母体株,角膜接触镜法建立两种菌株兔角膜感染动物模型,通过对动物模型在2、3、5及8 d不同时间点的临床观察和病变角膜的组织病理学检查,比较两种菌株的毒力;并建立两种菌株孢子与体外培养的兔角膜基质细胞共同孵育体系,通过扫描电镜、酶联免疫吸附实验及流式细胞仪检测,观察两种菌株对细胞的影响,确定PLB的毒力作用机制.结果 两种菌株菌丝在角膜中均呈垂直方式生长;动物模型接种后2 d,两种菌株菌丝在角膜中的浸润深度比较差异有统计学意义(P=0.002);而在3、5及8 d时间点的两种菌株菌丝浸润深度及所有时间点的兔角膜真菌感染的临床表现、角膜炎性反应程度比较差异均无统计学意义(P＞0.05).与单层细胞共同孵育后,两种菌株孢子、菌丝的黏附率、菌丝生成率比较差异无统计学意义(P＞0.05),而破坏穿透细胞膜的菌丝数量比较差异有统计学意义(P=0.009);角膜基质细胞加母体株孢子悬液组培养上清中前列腺素E2(PGE2)的含量为(65 466±5773)pg/ml,较角膜基质细胞加缺失株孢子悬液组培养上清的PGE2含量(18 025±5232)pg/ml明显升高;母体株组、缺失株组及正常对照组细胞膜被破坏细胞的百分比分别为3.02%、2.04%及0.12%;凋亡细胞百分比分别为33.17%、27.56%及1.46%;正常活细胞百分比分别为63.81%、70.40%及98.41%.结论 白色念珠菌胞外PLB在兔角膜感染的整个病理损害中,仅在真菌黏附于角膜刚开始侵袭角膜细胞时有促进菌丝侵入细胞的作用,而在其后角膜炎性反应的病理损害中,并无明显的毒力作用.(中华眼科杂志,2008,44:237-243)
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