绵羊IFN-γ基因的克隆与序列分析

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将无菌采集的绵羊(湖羊)脾脏淋巴细胞进行体外培养,利用刀豆蛋白(ConA)刺激24h后提取总RNA,采用RT—PCR扩增绵羊IFN-γ基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,经PCR和双酶切鉴定后进行测序。测序结果表明,扩增的cDNA全长554bp,包含501bp开放阅读框,编码166个氨基酸,分子质量约为18.4ku。克隆的绵羊IFN-γ基因与GenBank上已公布的人、牛、山羊、马鹿、马、骆驼、猪、狗、猫和鸡的IFN-γ核苷酸序列进行比较,其同源性分别为75.2%,96.6%,99.0%,95.8%,
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