【摘 要】
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目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症血清诱导的血管内皮细胞高通透性的影响及其机制.方法:收集本院脓毒症患者和健康志愿者血清.体外培养人脐静脉内皮细胞EA.hy926,将细胞
【机 构】
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连云港市第一人民医院心功能室,连云港222000;连云港市第一人民医院心内科,连云港222000;连云港市第一人民医院影像科,连云港222000
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目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症血清诱导的血管内皮细胞高通透性的影响及其机制.方法:收集本院脓毒症患者和健康志愿者血清.体外培养人脐静脉内皮细胞EA.hy926,将细胞分为空白对照组(Blank)、实验对照组(CON)、脓毒症组(Sep)、NAC低剂量组(NAC-L)、NAC高剂量组(NAC-H)及高剂量NAC联合整合素金属蛋白酶10(ADAM10)抑制剂GI254023X组(NAC-H+GI254023X).分组处理后,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性;qRT-PCR法检测各组细胞ADAM10 mRNA表达水平;Transwell小室法检测各组单层细胞通透性;跨内皮细胞电阻法检测各组细胞跨膜电阻(TEER)值;Western blot法检测各组细胞ADAM 10、Occludin、ZO-1及VE-cadherin蛋白表达水平.结果:与Blank组和CON组比较,Sep组细胞增殖活性、TEER值、VE-cadherin、Occludin及ZO-1蛋白表达水平明显降低,而ADAM10 mRNA和蛋白表达量、细胞通透性明显升高(P＜0.05);与Sep组比较,NAC-H组细胞增殖活性、TEER值、VE-cadherin、Occludin及ZO-1蛋白表达水平明显升高,而ADAM10 mRNA和蛋白表达量、细胞通透性明显降低(P＜0.05),而NAC-L组的差异无统计学意义(P＞0.05);ADAM 10抑制剂GI254023X能显著增强NAC对脓毒症血清诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926高通透性的抑制作用.结论:NAC通过下调AD-AM10的表达水平,抑制脓毒症血清诱导的人脐静脉内皮细胞高通透性.
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