纤维蛋白酶谱检测蚯蚓纤溶酶组分

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目的建立鉴定蚯蚓纤溶酶粗酶液中活性组分的方法.方法根据蚯蚓纤溶酶能水解纤维蛋白的性质,建立了纤维蛋白-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Fibrin-SDS-PAGE),优化了电泳条件,电泳后酶所在部位为透明区带.结果分离胶中纤维蛋白终质量浓度为0.4×10-3 mg·L-1,电泳后胶板用2.5%TritonX-100复性30min,PBS缓冲液(pH 7.2)保温30min,考马斯亮蓝R-250染色,7%醋酸脱色,可以得到清晰的酶谱.结论该方法灵敏度高,用2μg样品,就能准确检测出
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