【摘 要】
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为了研究木兰假丝酵母（Candida magnolia）中的醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase）3（ADH3）的突变酶（AIDI）的纯化、酶学性质以及不对称还原合成（3R,5S）-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯的能力。
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)(2011CBA00804);国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA022101);江苏高校优势学科建设工程
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为了研究木兰假丝酵母（Candida magnolia）中的醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase）3（ADH3）的突变酶（AIDI）的纯化、酶学性质以及不对称还原合成（3R,5S）-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯的能力。首先对AIDI进行（NH4）2SO4沉淀、透析以及DEAE Sepharose离子交换层析。将纯化后的酶用于最适温度、pH、有机溶剂耐受等酶学性质的研究,同时考察底物浓度对催化效率的影响。结果发现:通过纯化获得了电泳纯的AIDI。酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。该醇脱氢酶的热稳定性较好,对环境pH的变化不敏感,在pH 48之间较为稳定。部分金属离子对该酶的活性具有抑制作用,特别是Fe2+对其具有显著抑制作用。在0.1 mol/L、pH 7.0的Na3PO4缓冲液中,底物质量浓度为50 g/L,30℃转化24 h,转化率能达到94%。
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