【摘 要】
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目的 探究miR129在氯喹增强顺铂促鼻咽癌细胞HNE1凋亡的作用及机制.方法 实验分为空白对照组、氯喹组、顺铂组、氯喹+顺铂组.MTT法观察HNE1细胞存活率;结晶紫染色法观察HNE1
【机 构】
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蚌埠医学院基础医学院,安徽蚌埠,233030蚌埠医学院药学院,安徽蚌埠,233030;蚌埠医学院临床学院,安徽蚌埠,233030;
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目的 探究miR129在氯喹增强顺铂促鼻咽癌细胞HNE1凋亡的作用及机制.方法 实验分为空白对照组、氯喹组、顺铂组、氯喹+顺铂组.MTT法观察HNE1细胞存活率;结晶紫染色法观察HNE1细胞集落克隆形成;采用HNE1细胞接种BALB/C裸鼠建立移植瘤模型,随机分为4组,6只/组,3d给药1次,连续用药4周,观察各组肿瘤生长情况;q-PCR检测HNE1细胞中miR129表达;质粒转染下调HNE1细胞miR129的表达;Western blot法检测自噬相关蛋白p62、LC3B、Beclin1和耐药蛋白P-gp的表达;Annexin V/PI双染法,检测细胞凋亡率.结果 体内外实验结果均显示氯喹+顺铂较顺铂单用能显著抑制肿瘤的生长(P＜0.01).体外实验表明,下调抑癌基因miR129能显著促进HNE1细胞自噬、上调P-gp的表达(P＜0.01);氯喹显著抑制顺铂诱导的HNE1细胞自噬,上调HNE1细胞中miR129的表达(P＜0.01);转染抑制miR129后,氯喹抑制顺铂诱导HNE1细胞自噬的作用被取消、氯喹和顺铂联合作用后HNE1细胞存活率显著增加(P＜0.05),细胞凋亡率显著降低(P＜0.01).结论 氯喹通过上调miR129抑制HNE1细胞自噬和耐药,增强顺铂的促凋亡作用.
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