表达肾癌G250基因和hGM-CSF基因HEK293细胞系的建立

来源 :岭南现代临床外科 | 被引量 : 0次 | 上传用户：MRMAMING

【摘要】

：

目的建立稳定表达肾癌G250基因与基因佐剂hGM-CSF基因编码蛋白的的HEK293细胞系。方法通过脂质体转染的方法,将表达肾癌G250基因与细胞因子GM-CSF基因的双顺反子pIG250-GM真

【作者】

：

陈怡叶秋萍刘鑫宫君原李淑琴

【机构】

：

广州中山大学孙逸仙纪念医院外科,广州暨南大学医学院生化与分子生物

【出处】

：

岭南现代临床外科

【发表日期】

：

2011年4期

【关键词】

：

肾细胞癌 G250 HGM-CSF G418抗性 HEK293细胞 Renal cell carcinoma G250 hGM-CSF G418 Resista

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目的建立稳定表达肾癌G250基因与基因佐剂hGM-CSF基因编码蛋白的的HEK293细胞系。方法通过脂质体转染的方法,将表达肾癌G250基因与细胞因子GM-CSF基因的双顺反子pIG250-GM真核表达质粒导入HEK293细胞中;经持续G418压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系;用免疫组化、ELISA和Western Blot方法,检测目的蛋白在HEK293细胞中的表达。结果经600 μg / mL的G418压力筛选后,获得了抗性细胞克隆;免疫组织化学方法检测到表达G250的阳性细胞;ELISA方法

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