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将马立克氏病病毒（ＭＤＶ）血清Ｉ型Ｒｉｓｐｅｎｓ株和ＲＬ株分别接种于原代鸡胚成纤维细胞，待出现８０％以上细胞病变后收获，经蛋白酶Ｋ消化，酚，氯仿抽提，乙醇沉淀细胞和病毒的总ＤＮＡ（ｔｏｔａｌＤＮＡ）。以此为模板，根据发表的Ｂ抗原基因核苷酸序列设计１对引物，通过聚合物酶链反应（ＰＣＲ）扩增出１条约２．８５ｋｂ的特异性条带，斑点杂交证实其对Ｂ抗原基因，双酶切消化后，克隆到质粒ｐＵＣ１９中，酶切分析表明