【摘 要】
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目的 探讨参附注射液对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW 264.7细胞)中高迁移率族蛋白B1 (high mobility group protein,HMGB1)/核转录因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路相关蛋白及通路下游炎症因子的干预作用.方法 经LPS诱导RAW 264.7细胞建立炎性损伤模型,用3、6、12 μL/mL剂量参附注射液干预细胞24 h.Western Blot法检测HMGB1、Toll样受体4(TLR4
【机 构】
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贵州中医药大学第二临床医学院,贵州贵阳550025;贵州中医药大学基础医学院,贵州贵阳550025
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目的 探讨参附注射液对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW 264.7细胞)中高迁移率族蛋白B1 (high mobility group protein,HMGB1)/核转录因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路相关蛋白及通路下游炎症因子的干预作用.方法 经LPS诱导RAW 264.7细胞建立炎性损伤模型,用3、6、12 μL/mL剂量参附注射液干预细胞24 h.Western Blot法检测HMGB1、Toll样受体4(TLR4)、NF-κB抑制蛋白oα(IκBα)、p65、p-p65和肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达;细胞免疫荧光法观察p65的核转位情况;Elisa法检测细胞上清中炎症因子HMGB1、白细胞介素1β(IL-1β)和TNFα的分泌水平.结果 与对照组比较,模型组RAW 264.7细胞中HMGB1、TLR4、p65、p-p65和TNFα蛋白表达均显著升高,IκBα的表达则显著降低;形态学观察到大量p65从胞浆向核内转移;细胞上清中HMGB1、IL-1β和TNFα的分泌水平显著升高.与模型组比较,参附注射液呈剂量依赖性抑制HMGB1、TLR4、p65、p-p65和TNFα的表达,上调IκBα的表达;有效抑制p65向核内移位;降低细胞上清中炎症因子HMGB1、IL-1β和TNFα分泌水平;上述作用均呈剂量依赖性.结论 参附注射液可能通过抑制HMGB1/NF-κB信号通路的激活而减轻LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应.
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