【摘 要】
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目的:观察稳心汤对缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响，并基于miR-126-5p/Bcl-2/心肌细胞线粒体通透性转换孔（mPTP）调控通路明确其作用机制。方法:使用5%CO2、1%O2、94%N2培养箱构建H9c2心肌细胞缺氧/复氧模型，并通过细胞转染技术达到miR-126-5p的过表达与抑制。待干预结束后观察心肌细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）释放水平、心肌细胞活性氧（ROS）含量；原位
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81973836）； 中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目（No.CI2021A00902）； 首都卫生发展科研专项（No.2020-1-4151）；
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目的:观察稳心汤对缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响，并基于miR-126-5p/Bcl-2/心肌细胞线粒体通透性转换孔（mPTP）调控通路明确其作用机制。方法:使用5%CO2、1%O2、94%N2培养箱构建H9c2心肌细胞缺氧/复氧模型，并通过细胞转染技术达到miR-126-5p的过表达与抑制。待干预结束后观察心肌细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）释放水平、心肌细胞活性氧（ROS）含量；原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测心肌细胞凋亡；流式细胞仪检测心肌细胞线粒体mPTP开放水平；蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测细胞色素C（Cyt-C）释放水平与Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平；实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测miR-126-5p及Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9的RNA表达水平。结果:与miR-126-5p低表达组比较，miR-126-5p过表达可显著降低LDH释放水平；减少心肌细胞ROS含量；改善心肌细胞凋亡率；提高心肌细胞CalceinAM水平，减少mPTP开放。miR-126-5p过表达可以减少H9c2心肌细胞Cyt-C释放水平，miR-126-5p低表达可部分减少H9c2心肌细胞Cyt-C释放水平。miR-126-5p过表达可上调Bcl-2蛋白与基因表达，下调Caspase-3与Caspase-9蛋白与基因表达。miR-126-5p低表达可部分上调miR-126-5p表达水平与Bcl-2蛋白与基因表达；部分下调Caspase-3与Caspase-9蛋白与基因表达。结论:稳心汤改善缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞损伤可能与调控miR-126-5p/Bcl-2/mPTP信号通路有关，从而减轻氧化应激反应，降低线粒体膜通透性，抑制心肌细胞凋亡，延缓心肌损伤。
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