莫氏巴贝斯虫裂殖子cDNA表达文库的构建及免疫学筛选

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:beautyfox110
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为了构建莫氏巴贝斯虫(Babesiamotasi)裂殖子cDNA表达文库,从中筛选和鉴定功能基因,利用差速离心法从莫氏巴贝斯虫感染的红细胞中纯化裂殖子,提取总RNA并纯化mRNA。在合成的双链cDNA两端加上含EcoRI和HindⅢ定向接头后连接到xSCREEN载体上。通过体外包装形成完整的噬菌体颗粒,并用之转染ER1647,构建莫氏巴贝斯虫裂殖子的cDNA表达文库。用莫氏巴贝斯虫阳性血清筛选cDNA文库,获得的阳性克隆,经过测序和Blast软件分析鉴定,然后利用末端快速扩增技术(RACE)对筛选到的功能
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