【摘 要】
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目的 建立大鼠肝卵圆细胞(HOC)增殖模型,探讨体外分离HOC的方法.方法 选择81只体重(200±20)g的雄性Wistar大鼠,随机分为对照组和模型组.采用2-乙酰氨基芴+2/3肝切除术的方法(2-acetylaminofluorene+two thirds partial hepatectomy,2-AAF+2/3PH)建立HOC增殖模型.使用不同剂量的2-AAF通过胃管灌喂,5d后行肝2/
【机 构】
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330002,南昌大学附属感染病医院重症肝病科,330002,南昌大学附属感染病医院重症肝病科
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目的 建立大鼠肝卵圆细胞(HOC)增殖模型,探讨体外分离HOC的方法.方法 选择81只体重(200±20)g的雄性Wistar大鼠,随机分为对照组和模型组.采用2-乙酰氨基芴+2/3肝切除术的方法(2-acetylaminofluorene+two thirds partial hepatectomy,2-AAF+2/3PH)建立HOC增殖模型.使用不同剂量的2-AAF通过胃管灌喂,5d后行肝2/3切除,术后第二天各组按设定剂量继续灌喂,并于术后4h、4d、8d、12d、16d不同的时间点取肝组织,行免疫组化染色检查其增生程度.取HOC增生最明显的大鼠组,利用改进的Selen胶原酶和Percoll密度梯度离心分离出大鼠HOC,在倒置显微镜、电镜下观察细胞特点.结果 2-AAF+2/3PH的方法能在不同时间点激活不同数量的大鼠HOC,其中以灌喂8d最为明显,而对照组未见HOC增殖.分离所得大鼠HOC的平均收获量为(2.0±0.32)×106,Typan blue拒染试验细胞活性率(89.20±2.10)%.结论 2-AAF+2/3PH是较理想的HOC增殖模型.胶原酶消化法与Percoll密度梯度离心能有效地分离HOC,是分离成体肝干细胞有效的方法。
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