刺梨及其近缘种PCR实验体系的建立与优化

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以刺梨及其近缘种月季为试材,进行了RAPD-PCR实验参数的确立和优化试验.结果表明,刺梨及月季25μL反应体系的最优组成为2.5μL 10×反应缓冲液,2mmol/LMg2+,0.2 mmol/L dNTP,1.6mg/L模板DNA,0.4μmol/L随机引物和1.2 U Taq DNA多聚酶.经PCR扩增验证,此反应体系亦适宜于刺梨的部分近缘种,可有效用于RAPD分析;通过将退火温度提高至50℃或采用"Touchdown"扩增程序,并在50μL反应体系中适当增加特异引物对
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