【摘 要】
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目的: 实现二硫键稳定的抗肝癌单链抗体与PE38融合,免疫毒素在大肠杆菌中的可溶性表达,为下游的活性检测等工作打下基础. 方法: 设计了两种不同的表达载体(GST、硫氧还蛋白促
【机 构】
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第四军医大学基础部病理学教研室,军事医学科学院生物工程研究所
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目的: 实现二硫键稳定的抗肝癌单链抗体与PE38融合,免疫毒素在大肠杆菌中的可溶性表达,为下游的活性检测等工作打下基础. 方法: 设计了两种不同的表达载体(GST、硫氧还蛋白促可溶表达载体),并通过改变宿主菌菌株、IPTG诱导浓度、诱导温度及诱导时间等,优化表达条件;通过ELISA法判断该免疫毒素中单链抗体的结合活性. 结果: 抗肝癌单链抗体与PE38融合蛋白在大肠杆菌Origami (DE3)的上清中得到表达,表达量占菌体总可溶蛋白量的21%;ELISA法证实该融合蛋白保持了亲本抗体的特异性. 结论:
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