宋内氏痢疾菌Ⅰ相抗原基因的克隆及鉴定

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gbcying
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

用柯斯质粒pJB8为载体,构建了宋内氏痢疾菌180kb大质粒的基因库。用菌落原位固相酶斑法从文库中初选出两株Ⅰ相抗原阳性克隆。经免疫印迹分析、脂多糖的银染色、重组质粒的转化等实验,证明重组菌株表达了宋内氏菌特异的O-抗原,重组质粒含有Ⅰ相抗原基因。动物实验显示重组菌株具有较好的免疫原性和免疫保护作用。为宋内氏痢疾菌保护性抗原的研究增加了资料。

其他文献
本文对新建立的生物发光(BL)法与传统的菌落形成单位(CFU)计数法的相关性和精确性进行了比较,冻干前、后卡介苗的ATP发光值(BL60 sec)与菌落形成单位数之间密切相关(r值分别为0.8155和0.8484,P<0.05)。这表明,新建BL法可以取代传统CFU法进行卡介苗活菌计数。此外,鉴于ATP发光值批间变异系数(cv=3.2~4.4%)显著低于CFU数批间变异系数(cv=10.4~11.
期刊
EB病毒核抗原(EBNA)是EB病毒潜伏感染时表达的主要抗原之一,由多种多肽成分组成。本文报道用大肠杆菌β-半乳糖苷酶/EBNA 1多肽融合蛋白免疫小鼠,获得3株可稳定分泌抗EBNA1单克隆抗体的杂交瘤(ⅠB10,ⅡB5和4D8)。用单克隆抗体检测EB病毒基因组阳性的几个细胞系中的EBNA1,均获阳性结果;用其检测鼻咽癌活检组织中的EBNA1,阳性率为51.5%,而健康人鼻咽部活检组织中无EBNA
期刊
本文将不同来源HBsAg的氨基酸组成及糖基化程度进行了比较,结果显示血源HBsAg、痘苗病毒表达及CHO细胞表达HBsAg的氨基酸组成无明显的差别;而其糖基化程度有差别,痘苗病毒表达HBsAg与血源HBsAg有一种糖基化形式(GP27),其糖基化程度均为24%左右;CHO细胞表达的HBsAg有两种糖基化形式(GP27及GP30),其总的糖基化程度接近40%;酵母表达的HBsAg没有糖基化。
期刊
应用6株抗-HBx单克隆抗体对乙型肝炎X抗原(HBxAg)进行了位点分析,发现HBxAg上有两种抗体结合位点,分别命名为a和b。同株单克隆抗体ELISA夹心法证明,一个HBxAg分子上含有至少2个a位点和2个b位点。经与兔抗-HBx多克隆抗体竞争抑制及位点密度分析,确定a位点为主要抗原位点,b位点为亚抗原位点。
以甲型肝炎-痘苗重组病毒辣VMS11HAV25感染人胚肺二倍体细胞(2BS)制备疫苗毒种。按常规痘苗接种方法免疫少量成人与学龄儿童。8名儿童(免前痘苗与甲肝抗体均阴性)接种后1个月痘苗与甲肝抗体全部阳转。免后两月甲肝抗体滴度为1:4~≥1:16,平均1:8(ELISA竞争抑制法)。中和抗体滴度1:10~1:80。免后6月甲肝抗体仍为阳性。7名成人(免前痘苗抗体阳性,其中5名甲肝抗体阴性)免后6人痘
用放射免疫沉淀的方法,鉴定单纯疱疹病毒(HSV)型共同性单克隆抗体(McAb)1D10的靶抗原是一分子量为60000道尔顿的糖蛋白,另6株McAb:1A12、Mad-2、2D11、CM-D3、2A8、1C4的靶抗原的分子量在105000~130000道尔顿之间。用McAb与HSV-1/HSV-2型间重组株作物理图谱的方法,定位出这些McAb靶抗原的编码基因,从而鉴定出McAb1D10的靶抗原是gD
提取宋内氏痢疾菌脂多糖中的多糖抗原与牛血清白蛋白共价交联,能增强多糖抗原对家兔的免疫原性,并能诱导加强免疫反应,产生高滴度的血清抗LPS抗体,抗血清能与宋内氏菌毒株、表达宋内氏菌O-抗原的杂交株和克隆株反应,针对的主要抗原决定簇为O-特异多糖,抗血清对小鼠有被动保护作用。