猪resistin(Retn)基因真核表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

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应用PCR技术从含有猪resistin基因(Retn)cDNA的质粒pMD18T-Retn中扩增Retn基因片段,将其克隆至pcDNA3.1(+)表达载体中,构建重组表达质粒pcDNA3.1-Retn。采用Lipofectamin^TM 2000转染Hela细胞,用G418筛选稳定表达的Hela细胞株。用RT-PCR、Tricine-SDS-PAGE和Western blot技术检测,结果表明Retn基因在Hela细胞中得到转录与表达。
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