【摘 要】
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根据GenBank中NDP kinase的基因序列,采用生物信息学方法将其中稀有密码子改造为大肠埃希菌常用密码子并进行二级结构优化,合成NDP kinase基因,构建原核表达载体pET28a-NDP k
【机 构】
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深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所,泸州医学院附属医院呼吸内科,深圳市过敏反应与免疫学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金（31328014,81300028）, 广东省高等学校国际暨港澳台科技合作创新平台（2012gjhz0009）, 深圳市科技计划基础研究（JCYJ20120613100657482）资助项目
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根据GenBank中NDP kinase的基因序列,采用生物信息学方法将其中稀有密码子改造为大肠埃希菌常用密码子并进行二级结构优化,合成NDP kinase基因,构建原核表达载体pET28a-NDP kinase并酶切鉴定其序列,在大肠埃希菌BL21（DE3）中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,重组产物采用镍离子金属螯合亲和层析柱纯化.经密码子改造和二级结构优化后NDP kinase基因长度为490 bp,其编码蛋白理论分子量为21.5 kDa,重组表达载体经酶切鉴定与理论推测结果相符,
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