建立免疫磁珠阴性法富集恶性胸腔积液肿瘤细胞的方法，探讨该方法富集胸腔积液中肿瘤细胞的敏感性、特异性及其应用价值。
方法将5、10、20、50、100个4，6－二眯－2苯吲哚(DAPI)染色的肺腺癌细胞系A549细胞分别加入20 ml心力衰竭患者的胸腔积液中[约含(1～10)×106个细胞]，通过免疫磁珠阴性法富集癌细胞，荧光显微镜检测体外加入癌细胞的回收率。收集2010年7月至2011年7月江苏省苏北人民医院呼吸科53例患者的胸腔积液，其中包括经活检病理证实的36例肿瘤患者的胸腔积液标本，男25例，女11例，年龄40～78岁，平均(63±9)岁；17例非肿瘤患者的胸腔积液标本，男8例，女9例，年龄25～81岁，平均(53±18)岁。应用免疫磁珠阴性法及密度梯度离心法富集53份胸腔积液标本并涂片，然后分别应用瑞姬染色、免疫荧光染色及荧光原位杂交(FISH)法进行肿瘤细胞鉴定。
结果分别加入5、10、20、50、100个经DAPI染色的肺腺癌A549细胞的回收率分别为75%、78%、82%、85%和88%，平均回收率为81.6%。应用免疫磁珠阴性法联合瑞姬染色检测恶性胸腔积液中肿瘤细胞的阳性率为81% (29/36)，免疫磁珠阴性法联合免疫荧光染色检出表达细胞角蛋白18(CK18)和DAPI阳性、白细胞共同抗原(CD45)阴性细胞的阳性率均为100%，免疫磁珠阴性法联合荧光原位杂交(FISH)检出肿瘤细胞的阳性率为86%(31/36)；密度梯度离心法联合瑞姬染色检出肿瘤细胞的阳性率为61% (22/36)。免疫磁珠阴性法联合瑞姬染色或FISH与密度梯度离心法联合瑞姬染色比较，差异均有统计学意义(χ2＝4.00, P＝0.039；χ2＝5.818，P＝0.012)。良性胸腔积液患者应用免疫磁珠阴性法联合瑞姬染色或FISH、密度梯度离心法联合瑞姬染色均未检出肿瘤细胞，而应用免疫磁珠阴性法联合免疫荧光染色检出CK18及DAPI阳性、CD45阴性细胞的阳性率为100%。
结论应用免疫磁珠阴性法富集胸腔积液肿瘤细胞的方法可行，且该方法联合瑞姬染色或FISH对恶性胸腔积液的诊断具有较高的敏感性和特异性，对于良恶性胸腔积液的鉴别具有重要意义；而联合CK18、DAPI、CD45标记的免疫荧光染色不能有效鉴别胸腔积液中的肿瘤细胞和间皮细胞，还需寻找更特异的肿瘤细胞抗体标志物。