【摘 要】
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目的 探讨Linc01135对过氧化氢作用的成骨细胞增殖分化及氧化应激损伤的影响及机制.方法 人成骨细胞hFOB 1.19分为Con组、H2 O2组、H2 O2+pcDNA组、H2 O2+pcDNA-Linc01135组及H2 O2+pcDNA-Linc01135+SB203580组.四甲基偶氮唑盐比色法(M T T)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测Runt相关基因2(Runx2)、骨钙素(OCN)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleave
【机 构】
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首都医科大学附属北京地坛医院骨科,中国 北京 100015
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目的 探讨Linc01135对过氧化氢作用的成骨细胞增殖分化及氧化应激损伤的影响及机制.方法 人成骨细胞hFOB 1.19分为Con组、H2 O2组、H2 O2+pcDNA组、H2 O2+pcDNA-Linc01135组及H2 O2+pcDNA-Linc01135+SB203580组.四甲基偶氮唑盐比色法(M T T)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测Runt相关基因2(Runx2)、骨钙素(OCN)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase3)、caspase3前体(Pro-caspase3)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)蛋白表达;试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Linc01135表达水平.结果 过氧化氢作用的成骨细胞中细胞OD值降低,G0-G1期细胞所占比例升高,S期细胞所占比例降低,Runx2、OCN蛋白表达水平降低,细胞凋亡率升高,Cleaved-caspase3表达水平升高,Pro-caspase3表达水平降低,T-AOC及SOD活性降低,MDA含量升高,Linc01135表达水平降低,p-p38MAPK蛋白表达水平降低(均P<0.05).过表达Linc01135后,成骨细胞中细胞OD值升高,G0-G1期细胞所占比例降低,S期细胞所占比例升高,Runx2、OCN蛋白表达水平升高,细胞凋亡率降低,Cleaved-caspase3表达水平降低,Pro-caspase3表达水平升高,T-AOC及SOD活性升高,MDA含量降低,p-p38MAPK蛋白表达水平升高(均P<0.05).p38MAPK信号通路阻断剂可减弱Linc01135对过氧化氢作用的成骨细胞增殖分化及氧化应激损伤的影响.结论 过表达Linc01135可能通过激活p38MAPK信号通路促进成骨细胞增殖、分化,抑制过氧化氢作用的成骨细胞凋亡及氧化应激损伤.
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