靶向转化生长因子β1的siRNA真核表达载体的构建及鉴定

来源 :医学临床研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：niyon

【摘要】

：

[目的]构建靶向转化生长因子β1（TGFβ1）小干扰RNA（siRNA）的真核表达载体.[方法]设计二个siRNA作用靶点,体外合成的相应双链DNA被插入pSilencer-2.1质粒中,对该重组表达载体进行

【作者】

：

付荣泉盛吉芳丁继光吴金国洪亮孙庆丰方辉

【机构】

：

温州医学院附属第三医院感染科,浙江大学医学院附属第一医院感染科

【出处】

：

医学临床研究

【发表日期】

：

2010年11期

【关键词】

：

RNA 遗传载体转化生长因子Β RNA genetic vectors transforming growth factor beta

【基金项目】

：

浙江省自然科学基金计划项目（Y2080599）

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[目的]构建靶向转化生长因子β1（TGFβ1）小干扰RNA（siRNA）的真核表达载体.[方法]设计二个siRNA作用靶点,体外合成的相应双链DNA被插入pSilencer-2.1质粒中,对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序.采用脂质体转入HSC-T6细胞中,利用RT-PCR法和western-blot分别检测TGFβ1 mRNA和蛋白的表达.[结果]靶向TGFβ1 的siRNA-a和siRNA-b二个表达质粒是成功构建; 与无关对照组相比,siRNA-b组对TGFβ1mRNA和蛋白表达均明显下调（

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