【摘 要】
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目的 用聚合酶螺旋反应(PSR)建立快速、灵敏、特异的鼠疫菌等温扩增方法.方法 根据鼠疫菌F1基因设计引物,利用Bst DNA聚合酶链置换活性,通过添加pH指示剂和核酸荧光染料SYBR
【机 构】
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中国检验检疫科学研究院,北京,100176;中国人民解放军疾病预防控制中心;大连海关;呼和浩特海关
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目的 用聚合酶螺旋反应(PSR)建立快速、灵敏、特异的鼠疫菌等温扩增方法.方法 根据鼠疫菌F1基因设计引物,利用Bst DNA聚合酶链置换活性,通过添加pH指示剂和核酸荧光染料SYBR Green Ⅰ,建立可视化PSR检测方法,并用于鼠脏器、血液、环境样本中鼠疫菌的检测.结果 建立的PSR方法可在40 min内得到结果,最佳反应温度为64℃,最低检测限为100拷贝/μl,与14株非鼠疫菌无交叉反应.可成功检测模拟阳性样本.结论 建立的PSR等温扩增反应为鼠疫菌的快速检测提供了新方法.
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