【摘 要】
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建立一种检测PCV3的LAMP方法,为现场快速诊断提供技术支持。根据PCV3全基因序列,设计了4条特异性引物,通过反应成分和反应条件的优化,建立了检测PCV3的LAMP方法,经过灵敏度试验、
【机 构】
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咸阳职业技术学院畜牧兽医研究所咸阳市动物疫病分子生物学诊断技术研究重点实验室;
【基金项目】
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咸阳市科学技术研究与发展计划项目(2019k02-63);咸阳职业技术学院重大科研项目(2018KYA01)
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建立一种检测PCV3的LAMP方法,为现场快速诊断提供技术支持。根据PCV3全基因序列,设计了4条特异性引物,通过反应成分和反应条件的优化,建立了检测PCV3的LAMP方法,经过灵敏度试验、特异性试验、重复性试验和临床样品检测对比试验,确定该方法的实用性。结果表明,该方法检测的极限为10个拷贝/μL的质粒模板,与PRV、PPV、PCV-2、猪大肠杆菌、猪沙门氏菌DNA无交叉反应,重复性良好。应用该方法检测84份组织病料或血清,PCV3阳性率为15.5%,常规PCR方法阳性率为13.1%,两种检测方法符合率为97.6%(82/84)。LAMP方法比常规PCR方法检出率更高,可用于PCV3的现场快速诊断。
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