【摘 要】
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目的将缺失一段编码序列的真核硒代半胱氨酸-tRNA特异性延伸因子（EFsec-）基因补齐,并克隆到真核表达载体进行初步表达分析。方法采用人工合成法合成所缺失的基因片段,然后利用E
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目的将缺失一段编码序列的真核硒代半胱氨酸-tRNA特异性延伸因子（EFsec-）基因补齐,并克隆到真核表达载体进行初步表达分析。方法采用人工合成法合成所缺失的基因片段,然后利用EFsec-基因序列中靠近5＇端存在的天然酶切位点进行酶连,再用PCR方法扩增出拼接产物,并将其克隆到pcDNA3.1（-）载体。采用脂质体转染法转染HEK293T细胞后应用RT-PCR法检测EFsec基因的表达。结果准确快捷地将EFsec-基因补齐了其5＇端缺失的基因序列,并成功地构建了其表达质粒pcDNA3.1-EFsec,转染
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