重组人可溶性凋亡素-2配体在Pichia系统中的表达

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:toelfdd
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目的:在甲醇营养型酵母(Pichia)表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL,凋亡素-2配体)分子。方法:人可溶性TRAIL编码基因片段插入pIC3.5酵母表达载体,氯化锂转化酵母GS115株,甲醇诱导表达5d,SDS-PAGE和Western-blotting确认表达,L929细胞鉴定活性。结果:发现在酵母细胞中重组表达的TRAIL在SDS-PAGE上占总蛋白的50%以上,用抗人TRAIL多抗可以确认表达了TRAIL重组分子,杀伤肿瘤细胞的比活性较原核表达后复性的TRAIL有明显提高,并能诱导几株肿瘤细胞DNA片段化,说明TRAIL可能已正确折叠并形成活性必需的高级结构。结论:在Pichia系统中正确表达了人可溶性TRAIL分子。
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