目的建立兔血浆中异烟肼(Isoniazid,INH)的反相高效液相色谱分析方法(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)。研究其静脉给药后兔体内血浆药代动力学参数。方法以Agilent ZORBAX SB-C18柱(5μm,4.6mm×250mm)为INH的分析柱,流动相为0.02 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(H3PO4调pH4.0)∶乙腈=55∶45;流速1.0 mL·min-1;柱温:35℃,血浆经桂皮醛衍生化后325nm波长下检测。8只新西兰大白兔分别按INH 11.43 mg·kg-1静滴,RP-HPLC法检测血浆药物浓度。所得血药浓度数据经DAS软件拟合分析。结果 INH在0.05~20μg·mL-1血浆浓度范围内线性关系良好(r=0.99989),最低检测浓度为50ng·mL-1,平均提取回收率为100%,日内、日间变异系数(RSD=5)分别为1.2%~4.3%和2.5%~4.4%。INH在兔体内药代动力学过程符合双隔室模型(权重系数为1/cc),T1/2=(1.92±0.80)h,Cmax=(9.70±1.38)mg·L-1,AUC(0-∞)=(20.97±3.11)mg·(h·L)-1。结论本研究建立的兔血浆异烟肼HPLC方法具有较高的灵敏度、精密度和特异性,适用于兔体内药代动力学的研究。兔体内异烟肼药代动力学过程符合双隔室模型,体内药代谢动力学参数为异烟肼其它剂型的研究提供参考。