【摘 要】
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目的建立一种简单、易行的海马神经元无血清体外培养方法以获得高纯度、高活力的海马神经元。方法取新生24 h内SD大鼠,分离海马,经消化后种植于包被有Matrigel基膜的玻片上,2
【机 构】
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河北医科大学第二医院麻醉科,河北医科大学神经生物研究室
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目的建立一种简单、易行的海马神经元无血清体外培养方法以获得高纯度、高活力的海马神经元。方法取新生24 h内SD大鼠,分离海马,经消化后种植于包被有Matrigel基膜的玻片上,24 h后换含有N2、B27的Neuro-basal无血清培养基,于不同时间在倒置相差显微镜下观察细胞的生长状态;采用β-tublinⅢ免疫荧光细胞化学技术鉴定海马神经元纯度。结果大部分海马神经元于3～24 h贴壁且可长出细长突起,3 d细胞具有典型神经元的形态特征,5d后神经元突起进一步增多并形成稠密的网络连接,7 d后神经元胞体丰满,趋于成熟。经β-tublinШ免疫荧光技术鉴定纯度为94.2%±3.6%。结论此方法简单有效,可获得高纯度的海马神经元。
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