【摘 要】
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目的探索人骨形成蛋白3(hBMP3)在昆虫杆状病毒系统中的表达规律.方法将hBMP3全长cDNA克隆入转移载体BacPK8中,酶切鉴定后, 将此载体与病毒DNA经脂质体包裹转染昆虫细胞,重组
【机 构】
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第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室
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目的探索人骨形成蛋白3(hBMP3)在昆虫杆状病毒系统中的表达规律.方法将hBMP3全长cDNA克隆入转移载体BacPK8中,酶切鉴定后, 将此载体与病毒DNA经脂质体包裹转染昆虫细胞,重组病毒经蓝白筛选后,提取其DNA进行PCR反应,鉴定目的基因.收集重组病毒感染5 d的细胞进行免疫荧光及电子显微镜观察.结果克隆了目的基因的重组载体经内切酶消化后,琼脂糖电泳示有相应大小的目的基因片段切下.PCR电泳结果见有目的基因片段的扩增.免疫荧光检测见阳性颗粒分布在昆虫细胞的胞质及胞膜,电镜下见重组病毒无多角体颗粒,与野生型杆状病毒完全不同.结论初步证实hBMP3在此套系统中获得了表达
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