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Klotho基因真核表达载体的构建及其在TCMK-1细胞中的稳定表达

来源 :上海交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：R_Edge
【摘 要】
：
目的构建小鼠Klotho基因真核表达载体，进而获得稳定表达Klotho分子的小鼠肾上皮细胞株TCMK-1。方法应用PCR方法扩增带有FLAG标签的Klotho编码基因，并克隆至载体pCD．CXIN（CMV-MCS-
【作 者】
：
沈玥 路丽明 钱盈盈 关雪晶 齐渊元 倪兆慧 钱家麒 严玉澄 
【机 构】
：
上海交通大学医学院附属仁济医院肾脏科,上海交通大学医学院上海市免疫学研究所
【出 处】
：
上海交通大学学报(医学版)
【发表日期】
：
2014年5期
【关键词】
：
KLOTHO 内部核糖体进入位点序列 FLAG标签 TCMK-1细胞 Klotho internal ribosome entry sites sequence 
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目的构建小鼠Klotho基因真核表达载体，进而获得稳定表达Klotho分子的小鼠肾上皮细胞株TCMK-1。方法应用PCR方法扩增带有FLAG标签的Klotho编码基因，并克隆至载体pCD．CXIN（CMV-MCS-IRES-Neomycin）的相应位点；经酶切及测序鉴定重组质粒，脂质体转染TCMK-1细胞，通过G418筛选得到稳定表达Klotho分子的TCMK-1细胞株；Real-TimePCR检测KlothomRNA水平，Westernblotting检测Klotho蛋白的表达。结果将带有FLAG标签的
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