【摘 要】
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目的 探讨多药耐药蛋白4(MRP4)表达对结直肠癌细胞照射敏感性的影响.方法 应用慢病毒感染RNA干扰技术(RNAi)稳定下调人结直肠癌细胞株HCT116中MRP4的表达.将HCT116细胞分为未
【机 构】
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第二军医大学长海医院肛肠外科,第二军医大学基础部流行病学教研室,第二军医大学长海医院放疗科
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目的 探讨多药耐药蛋白4(MRP4)表达对结直肠癌细胞照射敏感性的影响.方法 应用慢病毒感染RNA干扰技术(RNAi)稳定下调人结直肠癌细胞株HCT116中MRP4的表达.将HCT116细胞分为未感染任何病毒的细胞株(CON)、加阴性对照病毒感染的细胞株(NC)和加RNAi靶点病毒感染的细胞株(KD)3组,应用实时定量RT-PCR和Western blot分别从RNA和蛋白水平检测MRP4表达变化,以验证RNAi的有效性.4 Gy剂量照射后24 h,流式细胞术检测细胞凋亡,MTT检测细胞增殖,比较RNAi后HCT116细胞株照射敏感性的差异.结果 成功构建并转染慢病毒质粒,获得稳定沉默MRP4表达的HCT116-KD细胞株.HCT116-KD细胞株MRP4 mRNA和蛋白表达水平较对照均明显下调(P＜0.05).照射后24 h,KD细胞株凋亡率为(71.7±0.8)％,明显高于CON组[(56.1±0.9)％]和NC组[(59.8±0.8)％](P＜0.05).照射后48 h和72 h,KD细胞增殖能力较对照组明显下降(P＜0.05).结论 MRP4在结直肠癌细胞中的表达水平与照射耐受显著相关,应用慢病毒感染RNA干扰下调MRP4表达可以增强结直肠癌细胞照射敏感性.MRP4有可能成为预测放疗敏感性的分子标志物.
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