茶树咖啡碱合酶cDNA在大肠杆菌中的表达

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用RT—PCR法扩增出茶树咖啡碱合酶(TCS)cDNA编码区全序列,并将其克隆到表达载体pET32a(+)中,得到重组质粒pET—TCS,再通过在表达宿主菌BL21trxB(DE3)中的高效表达,产生相对分子量约为62000的融合蛋白。该融合蛋白包括含112个氨基酸残基的硫氧还原蛋白及含370个氨基酸残基的茶树TCS蛋白。实验结果表明,随着诱导时间的延长,通过表达产生的融合蛋白量逐渐增加,
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