PRAS40与14-3-3蛋白各亚型相互作用的酵母双杂交系统检测

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：junhao1987

【摘要】

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PRAS40是近几年新发现的Akt作用底物，14—3—3结合蛋白。为确定PRAS40与14—3—3蛋白7种亚基间相互作用关系．利用gateway方法构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒pEG-PRAS40及转

【作者】

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刘康武黄蓓谭阳吴东明

【机构】

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安徽大学生命科学学院

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2007年4期

【关键词】

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GATEWAY技术 PRAS40 14-3-3 酵母双杂交 gateway cloning technology PRAS40 14-3-3 yeast

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PRAS40是近几年新发现的Akt作用底物，14—3—3结合蛋白。为确定PRAS40与14—3—3蛋白7种亚基间相互作用关系．利用gateway方法构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒pEG-PRAS40及转录激活质粒pJG-PRAS40，将PRAS40和14—3—3各亚型质粒分别作为诱饵蛋白质粒及转录激活质粒共转化酵母细胞EGY48，通过氨基酸营养缺陷生长实验及阻半乳糖苷酶显色反应分析两种蛋白相互作用程度。酶切鉴定证实成功地构建了pEG-PRAS40和pJG-PRAS40质粒，酵母双杂交实验结果显示PRAS

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