【摘 要】
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利用大肠埃希菌表达非洲猪瘟病毒(ASFV)亲核结构蛋白p10,IPTG诱导可表达可溶性重组蛋白p10,分子量约为30 ku.SDS-PAGE和Western blot鉴定结果表明,成功获得重组蛋白p10,且重组蛋白可与ASF阳性血清发生特异性反应.将纯化后的p10作为抗原免疫新西兰白兔,分离血清并分析其反应特异性.ELISA检测结果表明,使用重组蛋白p10包被时,所得兔抗血清的效价可达1∶204800;使用ASFV病毒裂解物包被,所得兔抗血清的效价可达1∶400;表明制备的多克隆抗体能同时与原核表达和AS
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程重点实验室,南京210014;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程重点实验室,南京210014;南京农业大学动物医学院,南京21
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利用大肠埃希菌表达非洲猪瘟病毒(ASFV)亲核结构蛋白p10,IPTG诱导可表达可溶性重组蛋白p10,分子量约为30 ku.SDS-PAGE和Western blot鉴定结果表明,成功获得重组蛋白p10,且重组蛋白可与ASF阳性血清发生特异性反应.将纯化后的p10作为抗原免疫新西兰白兔,分离血清并分析其反应特异性.ELISA检测结果表明,使用重组蛋白p10包被时,所得兔抗血清的效价可达1∶204800;使用ASFV病毒裂解物包被,所得兔抗血清的效价可达1∶400;表明制备的多克隆抗体能同时与原核表达和ASFV全病毒蛋白反应.IFA检测结果进一步印证多克隆抗体能与ASFV发生特异性反应,表明该抗体具有良好的反应活性和特异性.综上所述,重组p10蛋白和多克隆抗体可为后续建立针对ASFV抗原、抗体的检测方法提供重要的生物材料.
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