【摘 要】
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真核表达系统因具有完整的翻译后修饰、表达蛋白免疫原性较小而成为制药行业生产蛋白药物的新方向。该研究目的是构建CD137L融合基因真核表达载体,瞬时转染HEK293F细胞实现高效表达并进行蛋白纯化与活性分析。以该实验室保存的含有CD137L融合基因的质粒p ET11a-FP为模板,采用PCR技术在目的基因N端添加长腹水蚤荧光素酶信号肽和Kozak基因序列、C端添加6×His纯化标签,使用XbaⅠ、EcoRⅠ限制性内切酶酶切并插入pc DNA3.1(+)载体,并对其进行双酶切和测序鉴定,通过转染试剂PEI将构
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真核表达系统因具有完整的翻译后修饰、表达蛋白免疫原性较小而成为制药行业生产蛋白药物的新方向。该研究目的是构建CD137L融合基因真核表达载体,瞬时转染HEK293F细胞实现高效表达并进行蛋白纯化与活性分析。以该实验室保存的含有CD137L融合基因的质粒p ET11a-FP为模板,采用PCR技术在目的基因N端添加长腹水蚤荧光素酶信号肽和Kozak基因序列、C端添加6×His纯化标签,使用XbaⅠ、EcoRⅠ限制性内切酶酶切并插入pc DNA3.1(+)载体,并对其进行双酶切和测序鉴定,通过转染试剂PEI将构
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政策扩散理论研究的兴起,为学术界理解政府政策制定与决策过程提供了新的思路。国外政策扩散经典理论与前沿成果存在如下特点与关联:概念界定一致性、研究方法创新性、特征规律权变性、动力因素多元化、扩散机制与扩散模式传承性。掌握国外政策扩散热点话题和前沿动态,并探索未来发展空间,一方面有利于厘清政策扩散研究的理论进路,另一方面有助于国内学术界更好掌握政策扩散理论研究概况和最新进展,为我国因地制宜构建适用于中国特色实践进路的理论体系提供助益。
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