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提出了高效液相色谱法测定环孢素A含量的方法。以Agilent Extend C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）为固定相，以乙腈、水、叔丁基甲醚和磷酸按体积比500比500比50比1的混合溶液为流动相，用紫外检测器检测，检测波长为210nm。环孢素A的质量浓度在0．025～2．00g·L-1范围内与其峰面积呈线性关系。方法应用于环孢素原料药分析，测定结果的相对标准偏差（n=6）小于1．0％，用标准加入法做回收试验，回收率在99．3％～101％之间。