论文部分内容阅读
为了探讨凝血酶通过损伤肾小球内皮细胞(GEC)介导肾小球疾病的机制,观察了纯化的α凝血酶对体外GEC增殖、生长状况以及表达纤溶酶原激活物(PA)、纤维连接蛋白(FN)的影响,并用水蛭素和抑肽酶进行了阻滞试验。采用噻唑蓝(MTT)法测细胞增殖,纤维蛋白平板法测总PA活性,发色底物法测组织型纤溶酶原激活物(t-PA)活性,ELISA和间接免疫荧光法检测FN含量。结果表明:(1)0.4~3.2NIH U/ml凝血酶显著促进GEC的增殖和代谢,P<0.05;(2)3.2NIH U/ml凝血酶刺激32小时后可诱导GEC脱壁,这种作用可被水蛭素和抑肽酶阻断;(3)凝血酶明显增高培养上清中PA及t-PA活性,P<0.01;(4)凝血酶显著减少GEC培养上清中的FN含量,P<0.01。同时,细胞外基质中的FN含量也减少,且可被抑肽酶和水蛭素阻断。结论:凝血酶可导致GEC增殖、脱壁,后者可被抑肽酶阻断,因而很可能与细胞贴壁所必需的FN等细胞外基质被升高的PA活性过度降解有关。