人胰岛素样生长因子—Ⅰ基因农杆菌工程菌株的构建

来源 :西北农林科技大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zq09171
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采用固相亚磷酸三酯法人工化学合成了人胰岛素样生长因子-Ⅰ(huIGF-Ⅰ) 基因的4条寡核苷酸片段,再通过片段1、2与3、4末端互补配对和Klenow酶促补平及酶切连接成为完整的huIGF- Ⅰ DNA片段,用EcoRⅠ/PstⅠ酶切后克隆于pGEM T-Easy Vector,经测序证明所得DNA序列与设计的序列完全一致;选用植物偏爱密码子校正了启始密码子ATG下游的6个密码子,并在ATG处增加Kozak序列后,插入pBI121的{BamH} Ⅰ/Sac Ⅰ位点,构建了以35S为启动子的植物表达
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