【摘 要】
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目的:探讨趋化因子受体4（Cxcr4）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BMSC）来源的外泌体对再生障碍性贫血（AA）的改善作用，并初步探究其作用机制。方法:分离培养小鼠的BMSC，采用携带Cxcr4基因的重组慢病毒感染BMSC，通过荧光显微镜观察绿色荧光表达，实时荧光定量PCR检测Cxcr4 mRNA表达，并提取Cxcr4基因修饰的BMSC来源的外泌体。实验设置为对照组、模型组、AA+BMSC组、AA
【基金项目】
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河北省卫生和计划生育委员会项目（20170811）； 张家口市科技攻关计划项目（1521087D）；
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目的:探讨趋化因子受体4（Cxcr4）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BMSC）来源的外泌体对再生障碍性贫血（AA）的改善作用，并初步探究其作用机制。方法:分离培养小鼠的BMSC，采用携带Cxcr4基因的重组慢病毒感染BMSC，通过荧光显微镜观察绿色荧光表达，实时荧光定量PCR检测Cxcr4 mRNA表达，并提取Cxcr4基因修饰的BMSC来源的外泌体。实验设置为对照组、模型组、AA+BMSC组、AA+NC-BMSC组、AA+Cxcr4-BMSC组，构建小鼠AA模型。除对照组和模型组外，其他三组小鼠通过尾静脉输注400μl不同来源的外泌体，2周后检测小鼠血常规指标与骨髓有核细胞数，HE染色观察骨髓病理形态学变化，流式细胞术检测调节性T细胞（Treg）表达水平。结果:经鉴定成功分离到小鼠BMSC，并获得Cxcr4高表达的BMSC及其外泌体。与对照组比较，模型组小鼠外周血中红细胞、白细胞、血小板数显著减少（P<0.01），血红蛋白含量和Treg细胞比例显著下降（P<0.01），骨髓有核细胞数显著减少（P<0.01）、增生较低，骨髓腔被大量脂肪细胞填充；与模型组比较，AA+BMSC组、AA+NC-BMSC组及AA+Cxcr4-BMSC组小鼠外周血中红细胞、白细胞、血小板数显著增加（P<0.01），血红蛋白含量和Treg细胞比例显著升高（P<0.01），骨髓有核细胞数显著增加（P<0.01），骨髓病理改变得到改善；此外，AA+Cxcr4-BMSC组小鼠外周血中红细胞、白细胞、血小板数，血红蛋白含量和Treg细胞比例较AA+BMSC组均显著升高（P<0.01），且骨髓有核细胞数也显著增加（P<0.01）。结论:注射Cxcr4基因修饰的BMSC来源的外泌体对AA小鼠具有一定改善作用，其机制可能与提高Treg细胞比例有关。
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