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目的:脂质体介导重组起搏基因pIRES2-EGFP—HCN:转染HEK293细胞,观察转染效率,探讨其构建生物起搏器的可行性。方法:对含hHCN:cDNA的PTR载体进行转化和扩增,将所得hHCN:基因定向克隆到真核表达载体pIR.ES2-EGFP中,双酶切来鉴定克隆的正确性。将重组质粒用脂质体转染HEK293,荧光显微镜观察EGFP的表达并计算转染效率。结果:构建了重组质粒pIRES2-EGFP—HCN2.荧光显微镜下可见转染后的HEK293呈绿色荧光,其转染效率可达90%以上。结论:成功构建了重组质粒