【摘 要】
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应用PCR方法扩增新型鸭细小病毒（NDPV）VP3基因,将其克隆至原核表达载体pQE1中,获得重组质粒pQE1-VP3。重组质粒pQE1-VP3经优化诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析并利
【机 构】
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河北农业大学动物医学院,河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,河北省兽医生物技术工程技术研究中心
【基金项目】
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河北省高校百名优秀创新人才支持计划（SLRC2017039）,国家重点研发计划项目（2017YFD0500806）
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应用PCR方法扩增新型鸭细小病毒（NDPV）VP3基因,将其克隆至原核表达载体pQE1中,获得重组质粒pQE1-VP3。重组质粒pQE1-VP3经优化诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析并利用His标签抗体对表达的蛋白进行Western blot鉴定。结果表明,NDPV VP3蛋白在25℃、IPTG浓度为1.0mmol/L经诱导5h,可获得最大诱导表达量,表达蛋白的分子质量约为60ku,主要以不溶性包涵体形式存在。纯化复性后,可获得浓度为5.165 mg/mL及纯度为97%的VP3蛋白。获得
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